s 《微生物实验》实验教学实施大纲-南京师范大学生命科学实验教学中心
 

《微生物实验》实验教学实施大纲

 

发布日期:2015-07-28  浏览次数:863


课程代码:BIOL001400                  课程学分:3

开课学期:第四学期课程总学时/实验学时:36

开课实验室名称:生物教学实验中心

 

一、   课程概述

微生物学实验技术是当前生物学人才必须掌握的基本技能,也是现代生物技术和生物工程的重要基础。本科微生物学实验课程是生物科学、生物技术和生物工程专业课程设置中的一门重要的基础实践课。微生物学实验课程将微生物学的基本实验技术组合成环境微生物多样性调查功能微生物的筛选鉴定、培养条件优化与选育水质微生物学检验三个模块化实验,每个模块实验以解决一个科学问题的形式将35个具有一定连贯性的单元实验串联起来,形成一种综合性、研究型的模块化微生物学实验。

二、  课程目标

微生物学实验课的教学目标是:1.使学生掌握研究与应用微生物的主要方法与技术,适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用。2.与微生物学基础理论课紧密结合,将书本知识用于实验,在实验中更深地理解基础理论,提高学生的综合能力与创新意识。3.通过综合性、模块化实验,提高学生分析问题和解决问题的能力。

三、  课程实验内容和要求

模块

序号

实验项目

实验类型

必做选做

时数

实验内容提要与要求

预习要求

实验评价标准

第一模块

1

环境样品采集、微生物分离与简单染色观察

探究+验证

必做

4

从各种样品中分离细菌、放线菌和霉菌;掌握微生物的平板划线分离和稀释分离;简单染色细菌并显微观察

预习

能够从样品中分离出细菌、霉菌、放线菌、噬菌体、并能将其纯化、染色、鉴定。能完成该模块总结和结果处理并进行实验论文写作。

2

细菌的形态特征观察、染色与霉菌放线菌准备

探究+验证

必做

4

观察前次实验所得到的细菌、霉菌、放线菌培养物,挑取典型的细菌菌落进行革兰氏染色、荚膜染色、芽孢染色,并显微观察,插片放线菌、霉菌

预习

3

放线菌与真菌的典型形态特征观察与细胞大小测定和显微计数

探究+验证

必做

4

了解丝状细菌和真菌的形态特征;测定酵母细胞大小、检测酵母细胞悬液样品中的单位体积数量

预习

4

自然界中噬菌体的分离与纯化

探究+验证

必做

4

从污水中分离大肠杆菌噬菌体并观察噬菌斑形态;掌握噬菌体的扩增、培养与检测的实验方法

预习

第二模块

5

培养基的配制、物品准备及灭菌

验证

必做

4

掌握配制微生物培养基的方法和注意事项;掌握高压蒸汽灭菌和烘箱干热灭菌的原理、适应范围和操作技术

预习

能掌握常用灭菌物品和培养基的制备;从样品中分离纯化功能微生物,并对其培养。会评价不同培养条件对微生物生长及功能的评价;掌握菌种分子鉴定、诱变育种和筛选方法

6

功能微生物的筛选与分离纯化

探究+验证

必做

4

掌握功能微生物,如产淀粉酶、蛋白酶、抗生素、有机酸等的细菌、霉菌放线菌的筛选分离方法;掌握一般的分析测试方法

预习

7

不同营养和培养条件对功能微生物生长和产物的影响

探究+验证

必做

6

液体摇瓶培养技术; 进一步掌握斜面接种技术和倒平板技术;了解不同营养成份和培养条件对微生物生长及酶活力的影响

预习

8

功能微生物的形态鉴定和分子鉴定

探究+验证

必做

4

了解微生物分类与鉴定中的基本程序和常规实验技术与方法;2.熟悉16S rRNA基因PCR扩增进行细菌鉴定的基本原理并初步掌握菌落PCR的操作技术;

预习

9

功能微生物的诱变育种

探究+验证

必做

6

掌握紫外诱变育种的基本实验方法;熟悉有关突变体的筛选方法以及筛选培养基的设计

预习

第三模块

10

水中细菌总数的测定

探究+验证

必做

4

掌握水体环境样品的采集、分离与总细菌菌落计数的方法

预习

掌握环境或食品样品采集、分析的各种方法

11

大肠菌群测定及生理生化实验

探究+验证

必做

6

掌握水体环境样品中大肠菌群的检测与生理生化测定

预习

12

大肠菌群的血清学检验

探究+验证

必做

4

掌握水体环境样品中大肠杆菌的抗原性检测

预习

 

13

细菌生长曲线的绘制

验证

选作

3

掌握比浊发测定细菌的数量及绘制细菌生长曲线的方法

预习

了解微生物生长特点,学习一步生长曲线绘制

 

14

细菌鞭毛染色观察片制备及鞭毛形态观察

验证

选作

3

学习并掌握细菌鞭毛染色的方法和形态观察

预习

学习鞭毛染色方法,观察细菌鞭毛

 

15

微生物的菌种保藏

综合

选作

3

掌握斜面传代保藏方法、液体石蜡保藏方法、沙土管保藏方法和冷冻干燥保藏方法等常用保藏方法

预习

学习细菌、真菌各种保藏方法

 

16

化能自养微生物的分离与纯化

验证

选作

4

掌握硅胶平板分离纯化硝化细菌和无氮培养基分离纯化固氮菌的方法

预习

掌握化能自养微生物生长特点和分离纯化方法

 

17

酸奶中乳酸菌的分离及酸奶的制作

综合

开拓

4

用稀释涂板法和MRS培养基进行乳酸菌的筛选、鉴定。小规模发酵生产酸奶进行品尝评价

预习

学习食品微生物分离及简单发酵食品制作

 

18

根霉的分离纯化及甜酒酿的制作

综合

开拓

6

从环境样品或米曲中分离和纯化根霉,鉴定其糖化能力,并学习小规模制备甜酒酿的方法进行品尝评价

预习

学习食品微生物分离及简单发酵食品制作

 

19

实验考试

综合

必做

6

分组、分批次进行基本实验操作的演练,考察学生对实验内容和操作手法的掌握

预习

抽检本学期所学微生物基本操作和知识

四、  评价

评价包括两部分内容,一是操作考试,所有学生随机抽取考题,现场操作,所有教师打分,平均成绩计入总评成绩的50%;二是撰写论文,每个模块实验结束后,学生将实验方法、实验结果按照研究论文的格式撰写成论文,3篇论文的成绩计入总评成绩的50%

五、     主要参考资料

1、《微生物学模块化实验教程》 何伟 徐旭士 编,高等教育出版社,2014

2、《微生物学实验教程》 周德庆 编,高等教育出版社,2006

3、《生物物质常用化学分析方法》 蔡武成 袁厚积 编,科学出版社,1982

4、《农业微生物学与实验技术》李阜隶 喻子牛 何绍江 编, 中国农业出版社,1996

5、《微生物学》 袁生 主编, 高等教育出版社, 2009

六、  其它说明

注:为选修提高实验。

教材:《微生物学模块化实验教程》 何伟 徐旭士  编,高等教育出版社,2014

 


课程主要实验仪器设备配备标准

序号

仪器名称

规格与型号

单位

(台套件)

用于何

实验项目

每套仪器人数

备注

1

722光栅分光光度计

722

6

713

2

 

2

电子天平

FA2004

6

156

2

 

3

托盘天平

TN-100B

8

156

2

 

4

离心机

GL-16G-

4

789

2

 

5

磁力搅拌器

90

6

678910

2

 

6

电热鼓风干燥箱

DL-102A

1

5

2

 

7

碎花制冰机

SIM-F124

1

常规设备

2

 

8

电泳槽

DYY-28A

2

核酸电泳

2

 

9

取液器

QYQ-20ul

20

常规设备

2

 

10

取液器

QYQ-100ul

20

常规设备

2

 

11

取液器

QYQ-200ul

20

常规设备

2

 

12

取液器

QYQ-1000ul

20

常规设备

2

 

13

透明门立式冷藏柜

SC-276

3

5

2

 

14

培养箱

WH-3

6

5

2

 

15

稳流稳压电泳仪

DY1002V

16

8

2

 

16

普通光学显微镜

尼康

60

全部

2

 

17

灭菌锅

Tomy

1

全部

2

 

18

水浴锅

国产

10

8

2

 

19

摇床

国产

3

 

2

 

 

 

撰写人: 何伟                    审订人:

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