s 《海洋微生物实验》实验教学实施大纲-南京师范大学生命科学实验教学中心
 

《海洋微生物实验》实验教学实施大纲

 

发布日期:2015-07-28  浏览次数:708


课程代码: MARI003506课程学分:3

开课学期:第四学期          课程总学时/实验学时:36

开课学院:  生命科学学院     开课实验室名称: 微生物学实验室

 

一、     课程概述

海洋微生物学实验是海洋科学专业的必修课,是从事海洋生态学及海洋生物学相关职业的基本能力的重要专业实验课。

海洋微生物学实验通过实际操作训练着重培养学生掌握基础理论,基本实验知识和实验技能,培养学生独立工作能力,掌握海洋微生物常见种类及分离、培养的方法,生长曲线的测定,了解海洋微生物与环境之间的关系。

二、   课程目标

1.海洋微生物学实验主要任务是使学生掌握研究与应用海洋微生物的主要方法与技术,包括经典的、常规的、以及现代的方法与技术,使学生具有适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能。2.与海洋微生物学基础理论课紧密结合,使学生将理性知识与感性认识有机地结合,将书本知识用于实验,在实验中更深地理解基础理论,提高学生的综合能力与创新意识。3.提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点,逐步使学生认识海洋微生物的基本特性,比较它们与其它生物的相似和不同之处,知道如何研究海洋微生物以及对研究中所出现的问题点样分析,并加以解决。

三、   课程实验内容和要求

 

序号

实验项目

实验类型

必做选做

时数

实验内容提要与要求

预习要求

实验评价标准

1

环境样品采集、微生物分离与简单染色观察

验证

必做

3

从各种样品中分离细菌、放线菌和霉菌;掌握微生物的平板划线分离和稀释分离;简单染色细菌并显微观察

预习

能够从样品中分离出细菌、霉菌、放线菌、噬菌体、并能将其纯化、染色、鉴定。能完成该模块总结和结果处理并进行实验论文写作。

2

细菌的形态特征观察、染色与霉菌放线菌准备

验证

必做

3

观察前次实验所得到的细菌、霉菌、放线菌培养物,挑取典型的细菌菌落进行革兰氏染色、荚膜染色、芽孢染色,并显微观察,插片放线菌、霉菌

预习

3

放线菌与真菌的典型形态特征观察与细胞大小测定和显微计数

验证

必做

3

了解丝状细菌和真菌的形态特征;测定酵母细胞大小、检测酵母细胞悬液样品中的单位体积数量

预习

4

水体中噬菌体的分离与纯化

验证

必做

3

从污水中分离大肠杆菌噬菌体并观察噬菌斑形态;掌握噬菌体的扩增、培养与检测的实验方法

预习

5

海洋培养基的配制、物品准备及灭菌

验证

必做

3

掌握配制微生物培养基的方法和注意事项;掌握高压蒸汽灭菌和烘箱干热灭菌的原理、适应范围和操作技术 

预习

能掌握常用灭菌物品和培养基的制备;从样品中分离纯化功能微生物,并对其培养。会评价不同培养条件对微生物生长及功能的评价;掌握菌种分子鉴定、诱变育种和筛选方法

6

功能微生物的筛选与分离纯化

综合

必做

3

掌握功能微生物,如产淀粉酶、蛋白酶、抗生素、有机酸等的细菌、霉菌放线菌的筛选分离方法;掌握一般的分析测试方法

预习

7

不同营养和培养条件对功能微生物生长和产物的影响

综合

必做

3

液体摇瓶培养技术;进一步掌握斜面接种技术和倒平板技术;了解不同营养成份和培养条件对微生物生长及酶活力的影响

预习

8

功能微生物的形态鉴定和分子鉴定

综合

必做

3

了解微生物分类与鉴定中的基本程序和常规实验技术与方法;2.熟悉16S rRNA基因PCR扩增进行细菌鉴定的基本原理并初步掌握菌落PCR的操作技术;

预习

9

功能微生物的诱变育种

综合

必做

3

掌握紫外诱变育种的基本实验方法;熟悉有关微生物突变体的筛选方法以及筛选培养基的设计思路

预习

10

食品及环境质量的微生物检验(一)

综合

必做

3

掌握食品、环境样品的采集、分离与总细菌菌落计数的方法

预习

掌握环境或食品样品采集、分析的各种方法

11

食品及环境质量的微生物检验(二)

综合

必做

3

掌握食品、环境样品中大肠菌群的检测与生理生化测定

预习

12

食品及环境质量的微生物检验(三)

综合

必做

3

掌握食品、环境样品中肠道细菌的抗原性检测

预习

13

细菌生长曲线的绘制

验证

选作

3

掌握比浊发测定细菌的数量及绘制细菌生长曲线的方法

预习

了解微生物生长特点,学习一步生长曲线绘制

14

海洋微藻形态观察和技术

验证

选作

3

在显微镜下认识观察海洋常见海洋微藻种类,熟悉掌握其形态学特征,掌握计数统计方法,及其分类方法。

预习

观察海洋常见海洋微藻种类,熟悉掌握其形态学特征,掌握计数统计方法,及其分类方法。

15

海洋细菌生长曲线的绘制

综合

选作

3

通过对海洋细菌的液体培养,观察、测定细菌的生长特性,记录细菌的生长情况,绘制生长曲线。

预习

了解微生物生长特点,学习一步生长曲线绘制

16

化能自养微生物的分离与纯化

验证

选作

4

掌握硅胶平板分离纯化硝化细菌和无氮培养基分离纯化固氮菌的方法

预习

掌握化能自养微生物生长特点和分离纯化方法

17

★酸奶中乳酸菌的分离及酸奶的制作

综合

开拓

4

用稀释涂板法和MRS培养基进行乳酸菌的筛选、鉴定。小规模发酵生产酸奶进行品尝评价

预习

学习食品微生物分离及简单发酵食品制作

18

★根霉的分离纯化及甜酒酿的制作

综合

开拓

6

从环境样品或米曲中分离和纯化根霉,鉴定其糖化能力,并学习小规模制备甜酒酿的方法进行品尝评价

预习

学习食品微生物分离及简单发酵食品制作

19

实验考试

综合

必做

6

分组、分批次进行基本实验操作的演练,考察学生对实验内容和操作手法的掌握

预习

抽检本学期所学微生物基本操作和知识

四、   评价

考试成绩办法:操作技能考试成绩占百分之五十,平时成绩占总成绩百分之五十。平时成绩评定依据:包括每次实验课的学习态度,操作过程要领的掌握与应用,能否得到预期的实验结果,实验报告的质量等。

五、   主要参考资料

1、《微生物学模块化实验教程》 何伟 徐旭士  编,高等教育出版社,2014

2、《海洋微生物学》张晓华 主编,中国海洋大学出版社,2007

六、   其它说明

注:★为选修提高实验。

教材:《微生物学模块化实验教程》 何伟 徐旭士  编,高等教育出版社,2014

 

 

课程主要实验仪器设备配备标准

序号

仪器名称

规格与型号

单位

(台套件)

用于何

实验项目

每套仪器人数

备注

1

722光栅分光光度计

722

6

713

2

 

2

电子天平

FA2004

6

156

2

 

3

托盘天平

TN-100B

8

156

2

 

4

离心机

GL-16G-

4

789

2

 

5

磁力搅拌器

90

6

678910

2

 

6

电热鼓风干燥箱

DL-102A

1

5

2

 

7

碎花制冰机

SIM-F124

1

常规设备

2

 

8

电泳槽

DYY-28A

2

核酸电泳

2

 

9

取液器

QYQ-20ul

20

常规设备

2

 

10

取液器

QYQ-100ul

20

常规设备

2

 

11

取液器

QYQ-200ul

20

常规设备

2

 

12

取液器

QYQ-1000ul

20

常规设备

2

 

13

透明门立式冷藏柜

SC-276

3

5

2

 

14

培养箱

WH-3

6

5

2

 

15

稳流稳压电泳仪

DY1002V

16

8

2

 

16

普通光学显微镜

尼康

60

全部

2

 

17

灭菌锅

Tomy

1

全部

2

 

18

水浴锅

国产

10

8

2

 

19

摇床

国产

3

 

2

 

 

撰写人:   何伟                      审订人:

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